产品货号:
GL3102
中文名称:
葡萄糖检测试剂盒(Folin-Wu比色法)
英文名称:
产品规格:
60T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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葡萄糖检测试剂盒(Folin-Wu微板法)可用于血清、血浆等样本中的葡萄糖含量定量测定,其中Glu标准(5mM)=90mg/dL。
无蛋白血滤液中的葡萄糖在加热的碱性环境中铜离子还原成氧化亚铜沉淀,后者使钼酸试剂还原成低价的蓝色钼化合物(钼蓝),使溶液呈蓝色,颜色深浅与葡萄糖含量成正比,其最高吸收峰为420nm,利用分光光度计测定样品和标准品的吸光度值,通过公式可以计算出样品的葡萄糖含量。
组分 | 规格 | 保存 |
Glu标准(5mmol/L) | 1mL | 4℃ |
蛋白沉淀液 | 10mL | RT |
蛋白酸化液 | 10mL | |
碱性铜溶液A | 11mL | |
碱性铜溶液B | 1.5mL | |
酸性钼酸盐溶液 | 25mL | RT避光 |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
- 全血、蒸馏水、PBS、生理盐水
- 离心管、水浴锅、分光光度计、比色皿、滤纸、血糖管
- 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
- 血液中抗凝剂不能加入过多,易导致沉淀颜色变化不明显。如果血沉淀经放置后不变为暗棕色或重滤后仍浑浊,可在混合液中加入10%稀硫酸1~2滴,待变为暗棕色后再过滤。
- 碱性铜工作液临用前按比例配置,不宜久存。
- 如样品吸光度值偏大,则需再次稀释后重新检测。如样品吸光度值偏小,则需增加样品用量后重新检测。
- 样品中含有蛋白等干扰物质时,须用去蛋白的方法处理后再行检测。
- 血液中除葡萄糖外,尚有其他还原物质,可导致测定结果可能偏高(100mL全血中偏高20~30mg)。
- 为防止溶液煮沸时管子爆开,导致液体溅出使测定结果有误差,可采用拧盖式离心管。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 本试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
- 无蛋白血滤液的制备:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,一般需要去除蛋白质(即为无蛋白血滤液)后再经检测。取用草酸钾或草酸钠抗凝的全血0.15mL,加入1.05mL蒸馏水混匀,溶血后(血液变为红色透明时)加入0.15mL蛋白沉淀液,混匀后再加入0.15mL蛋白酸化液,边加边摇匀,加毕充分摇匀,放置5~15min,至沉淀由鲜红色变为暗棕色。用干滤纸过滤,并在漏斗上盖一表面皿,如滤液不清,需重新过滤,每毫升无蛋白血滤液相当于0.1mL全血。
- 制备Glu标准(0.5mmol/L):取100μL Glu标准(5mmol/L),补加蒸馏水或者无菌水900μL,充分混匀即可;根据需用量,临用前按比例配制,不宜久存。
- 配制碱性铜工作液:临用前,按碱性铜溶液A∶碱性铜溶液B=9∶1的比例混合,即配即用。该混合液置4℃冰箱可保存数日,如暴露于阳光下,数小时即失效。
- Glu加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡,如果样品中的Glu浓度过高,可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入试剂(mL) 空白管 标准管 测定管 蒸馏水 0.2 - - Glu标准(0.5mmol/L) - 0.2 - 无蛋白血滤液或其他待测样本 - - 0.2 碱性铜工作液 0.2 0.2 0.2 混匀,沸水浴煮沸,取出,流水迅速冷却 酸性钼酸盐溶液 0.4 0.4 0.4 混匀,静置 蒸馏水 1.7 1.7 1.7 - Glu测定:混匀各管,以空白孔调零,比色杯光径1cm,用分光光度计读取420~440nm处标准孔和测定孔的吸光度。
每1mL全血中所含葡萄糖的浓度:
Glu(mmol/L)=A 测定/A 标准×0.5/0.1
Glu(mg/mL)=A 测定/A 标准×0.09/0.1
A 测定=测定管的吸光度
A 标准=标准管的吸光度
0.1=1mL无蛋白血滤液相当于0.1mL全血
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